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词条 tailPCR
释义

定义

Tail PCR,即热不对称交错PCR。

Tail PCR是 Liu et al (1999)在热不对称 PCR基础上发展起来的一种方法。Tail PCR是指利用一系列序列特异性的巢式引物和一个短的任意引物(arbitrary primer) 引导扩增已知序列的侧翼序列的反应,它 是一种半特异性的 PCR 反应,由于两类引物的退火温度不同从而可以通过控制反应过程中的退火温度,有效地控制特异性和非特异性产物的扩增。

特点

在 Tail PCR中序列特异性的巢式引物较长,退火温度较高,因此在 PCR 反应中退火温度的高低(相对)对它与目的序列的退火没有太大的影响,在高低两种退火温度下都可以与已知序列发生特异性的退火,而序列短的任意引物则仅可以在退火温度较低时与未知序列(已知序列的侧翼序列)发生退火,通过高低退火温度的交替进行,使目的基因得到有效的扩增。

Tail PCR分离法可以降低非侧翼区特异产物的背景,同时它可以产生2 个以上嵌套的目的片段,与其它方法相比 TAILPCR方法具有简便、特异、高效、快速和灵敏等特点。Hernández et al (2003) 和Yang et al (2005) 采用 Tail PCR分别获得了MON810 和 MON863 玉米的侧翼序列。

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更新时间:2025/1/9 17:21:48