| 词条 | Red/ET重组 |
| 释义 | 简介Red/ET重组是新近出现的一种基于λ噬菌体Red操纵子（Redα/Redβ/Redγ）和Rac噬菌体RecE/RecT重组系统的DNA工程技术。 通过该技术可以简单、快速地对任意大的DNA分子进行插入、敲除、突变等多种修饰，而且还可对长达80kb的DNA片段进行亚克隆。由于重组反应的整个过程都是在大肠杆菌细胞内部完成，因此不存在碱基突变危险。该技术已被广泛地用于基因组DNA，如细菌人工染色体、大肠杆菌染色体等的遗传修饰研究以及基因工程药物的研究和开发中。 Red/ET操作流程Red/ET技术流程图 Red/ET技术的主要应用重组质粒构建Red/ET重组中质粒修饰的四种策略 细菌人工染色体的快速修饰传统基因工程技术（A）和Red/ET重组技术（B）修饰E.coli染色体实验步骤比较 长片段基因克隆及亚克隆构建各种人类疾病的动物模型生物工程药物的研制基因打靶载体的构建展望基因组测序工程的实施与完成将越来越多的基因序列信息展现在人们面前，进一步明确这些已知或未知基因的功能是后基因组时代的一个重要研究内容。基因打靶小鼠模型是开展基因功能研究的一个非常有效途径,而其实施基础则是首先构建出相应的基因打靶载体。目前，基因打靶载体的构建主要依赖于酶切和PCR扩增技术。一般情况下，都是先通过酶切或PCR方法获得长、短臂基因组同源区,然后再分别与筛选标记基因和打靶质粒骨架进行多次连接、转化。除了操作相对繁琐外，由于大部分实验是在体外实施，操作过程中还具有碱基突变和缺失的危险，因此所构建的基因打靶载体往往需要进行测序验证。所以，用这种方法构建基因打靶载体相对费时费力。 科学家将Red/ET重组技术成功地引入到基因打靶载体构建之中。利用其可对长DNA片段进行亚克隆，不存在碱基突变危险的特点，建立了一种快速、高效的打靶载体构建方法。运用该方法进行基因打靶载体不仅省时、省力，而且高效、安全。此技术方法的建立为加速后基因组时代基因功能的研究提供了一条捷径。 |
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