| 词条 | 实验性变态反应性脑脊髓炎动物模型 |
| 释义 | 实验性变态反应性脑脊髓炎动物模型 实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE) 是一典型的实验模型。早在1944年Ferraro根据对一系列实验结果的总结，指出EAE和人的脱髓鞘病有相似之处。1947年Freund等报告,以脑或脊髓加Freund佐剂(FA) 进行免疫，仅需一次注射就能引起豚鼠EAE，而且成功率相当高。以后，以兔、小鼠、大鼠、 羊、猫、田鼠及猴等动物用同样方法均能复制成功，以豚鼠最为敏感。这里介绍用同种脊髓加FA进行免疫复制EAE的方法。 Freund氏左剂的制备参照Paterson的制法,液体石腊(c.p)8.5ml，无水羊毛脂(c.p)1.5ml，结核菌。用上述混合液配成4mg/ml的FA。高压灭菌后使用。 § 脊髓组织悬液： 于实验当时，在无菌条件下先将豚鼠肝素化，然后经胸主动脉用生理盐水灌洗至无血。取出脊髓，除去脊膜，称重，用玻璃研磨器将脊髓研成匀浆，以生理盐水配制成50％悬液。 脊髓-FA乳剂的制备：将脊髓组织悬液与FA按1:1混合，用注射器反复抽注，即成乳剂。 选用体重400g左右的豚鼠，于豚鼠的四个足掌肉垫各注射脊髓-FA 0.1ml， 每只豚鼠共注射0.4ml。注射后按常规饲养。 免疫注射半月后，血清中逐渐出现抗脊髓抗体，皮肤试验呈延缓反应，而且豚鼠陆续出现后肢瘫痪，甚至大小便失禁，很易死亡。 血清补体结合反应：由豚鼠心脏抽血，以3，000转/分离心30分钟分离血清。 抗原为1％脊髓生理盐水悬液，也经3，000转/分离心1小时，取其上清液作试验用。补体为2应用单位，溶血系统为2％绵羊红细胞及2单位的溶血素。 § 皮肤试验： 将豚鼠背部剃毛，用10％同种脊髓生理盐水悬液0.1ml作皮内注射， 注后当时及24、48小时观察皮肤反应。本实验在注后当时不见皮肤反应，而在24小时出现红斑或硬结，48小时仍存在，所以是延缓型反应。 组织学检查：在实验终了时处死动物，取出脑及脊髓等欲检查的脏器，福尔马林固定，常规切片、染色作镜检。可见脊膜及中央管周围有明显的淋巴样组织浸润、增厚，脊髓白质内有细胞浸润的小灶状病变及静脉周围呈套袖样浸润。神经细胞有坏死，细胞核消失呈匀质小体，或细胞体消失留下一空隙，以及细胞周围有圆细胞浸润等。在脑组织中可见到脑膜增厚，淋巴样细胞及单核细胞浸润。室管膜及脉络膜亦呈同样变化。小静脉及毛细血管周围，则呈套袖状细胞浸润。脑实质内有小胶质细胞组成的浸润灶。有些星状细胞呈核碎裂、胞浆苍白、细胞变形等。上述变化以脊髓的病理改变和瘫痪最为一致,是最特异的变化，仅见于注射脊髓加FA引起瘫痪的动物。血清抗体虽也有特异性,但与瘫痪或脊髓病变的程度无一致性关系；而皮肤反应则既有特异性，又与瘫痪及脊髓病变呈一致性。文献报导还曾指出，这种模型不能用血清抗体进行传递，但用淋巴细胞被动传递则能成功。提示病变的本质属于细胞免疫机制。至于脑内的变化,特异性较差,用FA或其它组织悬液加FA注射的动物也能发现，唯程度轻的多，可能是FA本身引起的，也可能因为其它组织和脑脊液之间有某些共同抗原性，从而引起交叉反应之故。 |
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