封固剂又称婊媒，顾名思义，它既能使染色后的组织封固于载玻片和盖玻片之间，不使直接与空气接触，避免氧化褪色。另一方面使组织切片在封固剂的充实下，其折光率能和玻片的折光率相近，从而获得清晰的镜检效果

名称

封固剂的作用

封固剂的作用原理

封固剂分类介绍(（一）含水封固剂 （二）无水封固剂)

封固剂的选择

参考文献

名称

封固剂 mounting agent

封固剂的作用

由于组织学制片需随时检查或保存，故要在盖玻片下封固。。

封固剂的作用原理

教学和科研用的切片有的需要反复观察和长期保存,故要求所用封固剂是近于中性、无色或微有颜色的，其折光率与所用的载玻片、盖玻片、透明剂等的折光率相近。因折折光率与透明度成正比，与未着色的组织识别力成反比，若封固剂的折光率高于组织，则透明度较佳，但识别力较差;反之，若折光率低于组织，则透明不良，但未染色部的识别较为清楚。未染色组织最好用有很高或很低折光率的封固剂封固。而染色的切片则以折光率在1．52至1．54之间的封固剂封固则透明度最佳。

封固剂分类介绍

（一）含水封固剂

1、优点：省去脱水、透明的步骤，材料由70%酒精中取出后可直接封固，操作简单，可防止水分含量大的组织在脱水过程中收缩。因此，很多藻类、真菌、苔藓及胚囊材料常用此类封固剂。

缺点：封固后容易失水，引起封固剂干缩或形成结晶，封固不坚固。

2、主要的含水封固剂

（1）、阿拉伯树胶

配方:

阿拉伯树胶40克，蒸馏水40毫升，甘油20毫升

先将阿拉伯树胶放入水中溶化，然后加入甘油，再加少许石炭酸以防腐。

（2）、甘油明胶封固剂（甘油明胶常用于脂肪染色的冰冻切片）

1）甘油明胶为含水封固剂 ， 用于不能使用油溶性封固剂的组织切片。组织切片不必经过脱水、透明等步骤即可封固,因此使用方便。但用含水封固剂封固的切片在梅雨季节,易受真菌侵袭而损坏,所以难以长期保存。其折光率为1.47,是脂肪染色的标准封固剂。

2）配制方法为:取蒸馏水60 mL置于三角烧瓶内,秤取化学纯的明胶l0g放人蒸馏水中,加热融化,再各加化学纯的甘油70mL、苯酚0.25g,不时搅拌,直至溶液混合均匀为止。配制好后装在试剂瓶中.备用,临用前将甘油明胶放入温箱,融化后即可封片。

(3)、Apath糖浆（用于证明淀粉样变的结晶染色法中）

（二）无水封固剂

1、 综述

（1）、无水封固剂系将一种树脂（天然或合成的）溶于其天然溶剂或二甲苯内直至呈适当的易 干易凝的流体状以便封固。其粘稠度以便易排除气泡且在盖玻片与切片之间能自由流动 为好，稍稠一点则可避免干燥后在盖玻片下形成空气间隙。中性树胶是很好的封固剂， 不仅折光率（1．52）及色散作用都近似于玻璃，而且在很薄一层时几乎是完全无色透 明。用以封存HE染色的切片则色彩非常鲜艳。干 固后即变硬，能把盖玻片和载玻片紧紧 地粘在一起。仅有的缺点是随着保存时间的延长，树胶逐渐使二甲苯氧化，产生甲苯酸及 邻苯二甲酸能使碱性染料褪色。

（2）、冰冻和火棉胶切片的封固，使用时组织切片必须脱水，透明彻底，使用无水封固剂，不 然片中会出现云雾状混浊，妨碍镜检。

（3）、因酸或碱性封固剂均可引起组织切片的褪色，故宜用中性封固剂。

无水封固剂有中性树胶，大马树脂及人工树脂等。

（4）、封固剂应保存于有色瓶中避免日光照射，并存放于暗处以防酸变。

2、加拿大树胶

（1）、加拿大树胶的性状：

浅黄至微绿色、粘性、透明、微有荧光的液体。有愉快香气。味苦。露置空气中渐变为固态的非结晶物质。能与苯、氯仿、二甲苯、乙酸乙酯和香柏油等混溶。溶于乙醇、乙醚、松节油和石油醚，不溶于水。相对密度0.987～0.994。折光率(n20D)1.52～1.54。

（2）、用途：

生化研究，镜片及盖玻片胶粘，贴附显微镜标本。用作清漆。加拿大树胶溶于二甲苯后，它的折光率是1.52，接近于玻璃的折光率（1.51），透明度很好，用以封片几乎无色，干后坚硬牢固，可长期保存。因此，它是封片常用的封藏剂。市售的加拿大树脂有浓液体和固体两种。如果是固体，可以在树胶中加入约相当于树胶体积一半量的二甲苯，放在温暖处，时常搅拌，促使树胶溶化。溶化后的较液浓度以胶液能沿玻璃棒一端顺利下流为宜（如果要封藏后使它干燥更快，可用苯代替二甲苯）。

（3）、加拿大树胶在使用和贮存时应注意：

a不能加热，否则树胶立即变成深褐色，影响封片后的观察

b树胶应贮存在棕色瓶内，避光保存

c玻璃瓶口应密闭，以防蒸发凝固

d为了防止树胶变酸，在树胶内加入几小块用二甲苯清洗过的大理石，以中和酸性

3、达马树胶

为松柏科植物——柳安所分泌的一种白色微带淡黄的半透明树脂。能溶于二甲苯、苯、松 节油、氯仿和250毫升二甲苯中。过滤、待蒸发到100毫升时即可使用。此封固剂的折不 率为1.52，能长期保存中性，封固作用好于加拿大树胶。

4、一种用松香配制的封固剂

配制方法如下：

松 香 12 g

纯酒精 5 ml

松节油 5 ml

封固剂的选择

选择一种封固剂，应以对所用的各种染色剂不褪色为原则。

如用碱性苯胺染料染色需封固于不含酸的封固剂内。象普鲁士蓝反应的切片应封固于非还原性封固剂内。

对于石蜡，冰冻和火棉胶切片的封固，使用时组织切片必须脱水，透明彻底，不然片中会出现云雾状混浊，妨碍镜检。

无水封固剂系将一种树脂（天然或合成的）溶于其天然溶剂或二甲苯内直至呈适当的易干易凝的流体状以便封固。其粘稠度以便易排除气泡且在盖玻片与切片之间能自由流动为好，稍稠一点则可避免干燥后在盖玻片下形成空气间隙。

参考文献

[1]林珍稜，亚寿大，蒋陆沈.细胞生物学实验[J].1996,07: 231-232.

[2]万怡震,贺普超.葡萄浆果冰冻切片技术参数的研究[J].西北植物学报,2001,21(2):382-386.

[3]汤传新,王士平.用松香配制切片封固剂.新疆学院学报[J],1981,4卷1期

[4]汪矛.植物生物学实验教程[J].2003,09:198-205.