大多数tRNA由七十几至九十几个核苷酸组成，分子量为25000～30000，沉降常数约为4S（个别tRNA的沉降常数为3S，含63个核苷酸）。曾用名有联接RNA、可溶性RNA、pH5RNA等。一种tRNA只能携带一种氨基酸，如丙氨酸tRNA只携带丙氨酸，但一种氨基酸可被不止一种tRNA携带。

同一生物中，携带同一种氨基酸的不同tRNA称作“同功受体tRNA”。