词条 | 超薄切片 |
释义 | 电子束穿透力很弱,须将标本制成40~50的超薄切片.方法与步骤:锇酸和戊二醛固定样品->丙酮逐级脱水->环氧树脂包埋_>以热膨胀或机械伸缩的方式切片_>重金属(铀,铅)盐染色. 一 取材的基本要求 组织从生物活体取下以后,如果不立即进行适当处理,会由于细胞内部各种酶的作用,出现细胞自溶现象。此外,还可能由于污染,微生物在组织内繁殖使细胞的微细结构遭受破坏。因此,为了使细胞结构尽可能保持生前状态,必须做到快、小、准、冷: (1).动作迅速,组织从活体取下后应在最短时间内 (争取在1分钟内) 投入2.5%戊二醛固定液。 (2).所取组织的体积要小,一般不超过1mm×1mm×1mm。也可将组织修成1mm×1mm×2mm大小长条形。因为固定剂的渗透能力较弱,组织块如果太大,块的内部将不能得到良好的固定。 (3).机械损伤要小,解剖器械应锋利,操作宜轻,避免牵拉、挫伤与挤压。 (4).操作最好在低温(0℃~4℃)下进行,以降低酶的活性,防止细胞自溶。 (5).取材部位要准确。 取材方法:将取出的组织放在洁净的蜡版上,滴一滴预冷的固定液,用两片新的、锋利的刀片成“拉锯式”将组织切下并修小,然后用牙签或镊子将组织块移至盛有冷的固定液的小瓶中。如果组织带有较多的血液和组织液,应先用固定液洗几遍,然后再切成小块固定。 |
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