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词条 异硫氰酸胍
释义

基本信息

分子式:CH5N3·HSCN

分子量:118.16

外观:白色结晶

熔点:115-120℃

PH(4%水溶液):4.5-7.0

紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit

紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit

干燥失重:≤0.5%

用途:用于变性裂解细胞;提取RNA和DNA。无RNA酶和DNA酶活性

TRIzol是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。

提取

异硫氰酸胍法提取制备模板核酸此法主要用于RNA的提取.标本为组织细胞及血清等.

1.异硫氰酸胍消化液

异硫氰酸胍4mol/L

柠檬酸钠(PH7.0)25mmol/L

十二烷基肌酸钠0.5%

β-巯基乙醇0.1mol/L

2.消化方法:用50~100ul细胞悬液及血清,加等体积的异硫氰酸胍消化液振混匀后,或65℃1小时,或室温放置数分钟,然后加1/10体积的3mmol/LpH5.2的醋酸钠缓冲液,再加等体积的酚:氯仿,用力振摇约10s,10000r/min,离心5min,取上清加等体积异丙醇-20℃放置3h后,14000r/min离心15min,沉定用75%冰冷乙醇离心洗涤1~2次,真空干燥,沉淀用TE缓冲液溶解即可用于逆转录PCR扩增,或放-20℃保存.

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更新时间:2024/12/23 14:26:35