细胞数量达饱和密度后，细胞遂停止增殖，进入停滞期。此时细胞数量不再增加，故也称平顶期（Plateau）。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动，继而培养液中营养渐趋耗尽，代谢产物积累、pH降低。此时需做分离培养即传代，否则细胞会中毒，发生形态改变，重则从底物脱落死亡，故传代应越早越好。指细胞自移植于新培养基时起，至开始出现活跃繁殖的这一期间。一般被移植的细胞越是培养后期的，其停滞期越长。其原因是培养后期的细胞群在一定程度上进行同步化，而G1期的细胞比例高，进入分裂期需要时间；另外来自原培养期间所受的退行性变化的恢复也是重要的原因。